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    細胞培養需注意哪些過程

    發布時間: 2022-07-26  點擊次數: 5222次

    細胞培養

    一、準備工作
    準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試等。


    二、取材
    在無菌環境下從機體取出某種組織細胞,經過一定的處理后接入培養器血中,這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的初次培養稱為原代培養。理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用于培養,實際上幼體組織比成年個體的組織容易培養,分化程度低的組織比分化高的容易培養。取材后應立即處理,盡快培養,因故不能馬上培養時,可將組織塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培養液中保存。取組織時應嚴格保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。

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    三、培養
    將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。如系組織塊培養,則直接將組織塊接入培養器皿底部,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養基。如系細胞培養,一般應在接入培養器皿之前進行細胞計數,按要求以一定的量(以每毫升細胞數表示)接入培養器皿并直接加入培養基。細胞進入培養器皿后,立即放入培養箱中,使細胞盡早進入生長狀態。


    正在培養中的細胞應每隔一定時間觀察一次,觀察的內容包括細胞是否生長良好,形態是否正常,有無污染,培養基的PH 是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對培養溫度和CO2 濃度也要定時檢查。


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    以上是細胞培養需注意哪些過程

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