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    常溫細胞處理方式

    發布時間: 2023-06-06  點擊次數: 635次

    細胞(Cells)是由英國科學家羅伯特·胡克(Robert Hooke,1635~1703)于1665年發現的。當時他用自制的光學顯微鏡觀察軟木塞的薄切片,放大后發現一格一格的小空間, [1] 就以英文的cell命名之,而這個英文單字的意義本身就有小房間一格一格的用法,所以并非另創的字匯。

    當收到了常溫的細胞,正確的處理方式應該是怎樣的。

    一、首先,觀察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。

        二、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量叢瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內趨置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。

        三、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

        四、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態;建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。

        五、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5m左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。

    六、懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離 心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5m培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密,度達80%左右時再進行傳代操作。

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